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成组t检验和配对t检验有什么分别? 生物学研究中,什么是TOPflash和FOPflash?

成组t检验和配对t检验有什么分别?

一、适用条件不同:
1、成组t检验适用于非配对设计或成组设计两样本平均数差异显著性检验;
非配对设计或成组设计, 当进行只有两个处理的试验时,将试验单元完全随机地分成两个组,然后对两组随机施加一个处理。
两组的试验单位相互独立,所得的二个样本相互独立,其含量不一定相等。
每组资料近似正态分布(或大样本),满足方差齐性,则可采用成组t检验 。
2、配对t检验适用于配对设计两样本平均数差异显著性检验。
适用以下情况:
(1)同一样本接受不同处理的比较;
(2)对同一个受试对象处理前后的比较;
(3)将受试对象按情况相近者配对,分别给予两种不同处理,观察两种处理效果有无差别。
二、检验假设不同
1、成组t检验无效假设 H0:μ1= μ2;
备择假设 H1: μ1不等于 μ2。
2、 可将配对设计资料的假设检验可视为样本均数与总体均数μd=0的比较。
H0:μd=0(即差值的总体均数为0);
H1:μd不为0(即差值的总体均数不为0)。


三、计算公式不同
1、成组t检验计算t值的公式:


2、配对t检验计算t值的公式:



四、检验效率不同
1、样本例数相同时,计量资料的成组检验比配对t检验检验效率低;
2、样本例数相同时,配对t检验效率高;因为采用配对方式,把一些对实验结果有影响的因素(如性别、体重等)进行匹配,消除了这些因素带来的干扰,降低了误差。
参考资料:
搜狗百科——t检验

生物学研究中,什么是TOPflash和FOPflash?

定义:
一种测定细胞内beta-catenin介导的转录活性的方法(经典wnt信号通路)!
最早由Hans Clevers实验室构建,但其信噪比不佳,后面由AjameteKaykas改良!
原理:
经典的Wnt信号通路需要beta-catenin入核,进而与转录因子TCF/LEF结合形成复合物,共同起始下游调控基因的转录。据此,科学家通过将数个拷贝的TCF/LEFDNA结合位点(AGATCAAAGGgggta,大写碱基为DNA结合序列,小写的碱基为间隔序列)克隆至含TA病毒最小启动子(minimalTA viral promoter )的萤火虫荧光素酶报告系统载体中,构建得到TOP-Flash质粒。该质粒可依据beta-catenin的活性强弱,调控下游萤火虫荧光素酶的表达量高低。进而将实验简化为检测荧光素酶的活性。同时为了减少误差,该系统还设计了包含突变的TCF/LEFDNA结合位点的对照质粒,即FOP-Flash载体。
由于荧光素酶报告系统的高灵敏性,为了减少操作误差,我们在平时使用时,往往还需要连同一个表达海肾荧光素载体,作为内对照,从而消除细胞活力、转染效果、裂解效果等系统误差(同双荧光素酶报告基因检测系统)!具体的TOP或FOP质粒与海肾荧光素载体的比例,需要个人通过实验优化,通常取值的范围在10/1到50/1。
数据处理:
通常以TOP/FOP的比值表示。
公式如下:
转染有TOP-Flash和海肾荧光素载体的样本中采集得到的萤火虫荧光值F(Top)/采集得到的海肾荧光值R(Top)

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