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基因工程原理题求答

基因工程原理题求答

1、α-互补和插入失活
在LacZ—的大肠杆菌中,在有IPTG诱导物和X-gal生色底物的平板培养中,菌落是白色的。若在该细胞中引入pUC质粒,其上有LacZ′,质粒和大肠杆菌DNA可实现α-互补, 表达出β-半乳糖苷酶,可降解生色底物使菌落呈蓝色。
如果在质粒的多克隆位点的某个酶切点上克隆了外源基因,则LacZ′基因受到破坏,便不能再和缺陷型受体菌中生成有活性的β-半乳糖苷酶,因此菌落呈白色。
实验设计自己设计吧。

2、酶谱的原理是:限制性内切酶在DNA上有特异的识别和切割位点,可将DNA切开而得到两个或两个以上的大小不同的片段,这些片段可通过电泳分离并检测其大小。双酶切法酶切图谱构建是使用两种不同的限制性内切酶对同一个DNA分子进行单酶切和双酶切,将所得的片段进行对比组装,对交替区域进行加减以确定酶切位点的相对位置。
所以选择的各限制酶识别顺序载体则分散于整个DNA分子中。

3、要求是在酶切酶联是不能移码这一原则。而且在选择酶切位点具有唯一性。否则会把载体切成很多段。
有一个软件可以用,你把你的序列输进去,他就会显示酶切位点和酶,然后你自己选择。软件是 DNAssist2.2
人工查找很麻烦。
你自己去下载自己找吧(或者叫学长帮你找出来,自己分析)。我没有软件。我也在忙考试。

4、同第二题。

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