导航菜单
首页 >  单细胞转录组和NIB  > 技术介绍

技术介绍

技术优势

蛋白种类多:CITE-seq可以一次检测100个以上的表面蛋白,可以与商业平台无缝衔接;抗体数不受限制,数量远超流式分选更清晰的鉴别细胞类型,可以注释到罕见细胞类型,发现新细胞亚群结合cell Hashing标签技术,可以有效改善dropout问题mRNA+蛋白:实现同一个细胞多组学联合检测,同时提供了mRNA和细胞表面蛋白的信息,信息量比传统的RNA单细胞测序更丰富

针对CITE-seq,10×Genomics提供的成熟的ADTs耦连标签体系以及详细的流程;采用Feature Barcode技术,可以有效进行免疫细胞的转录组和表面蛋白的研究,同时其对应的兼容产品(寡核苷酸偶联抗体、寡核苷酸偶联MHC)也可开展单细胞多组学分析。

10×Genomics产品Feture Barcode单细胞免疫组学介绍:Feature Barcode技术可以在单细胞分辨率上测定多达数百个细胞表面蛋白;既可以通过转录组信息研究细胞类型和状态,也可通过感兴趣的靶向表面蛋白对关注细胞类型进行重点研究,可以实现稀有细胞群体和稀有细胞状态的鉴定。

10×Genomics的Feture Barcode单细胞免疫组学的商业化流程:从未标记细胞、寡核苷酸偶联的抗体标记细胞,或与寡核苷酸偶联MHC结合细胞的单细胞悬液开始。在生成GEM后,每个样本最多可构建三个独立文库,从而生成多个可关联到同一单细胞的读数。通过Cell Ranger处理数据,再通过Loupe Browser或Loupe V(D)J Browser观察样本异质性和克隆扩增。

结果示例:针对复杂癌症中的多个免疫细胞群体,CITE-seq多组学数据提供了转录本与表面蛋白抗原互补的信息;利用抗体寡聚体标签ADTs,即16个标志物的组合进行聚类,细胞表面蛋白表达的分析能够将T细胞进一步划分为初始、记忆和耗竭的亚群。

通过单细胞技术进行的免疫细胞表型分析,可以对临床医学细胞层级的免疫机制和致病机制有更深入的理解,这些信息可以为后续针对具有治疗潜力的免疫因素,为当前的临床治疗提供有效的治疗方案。耦合的单细胞测序数据可以更精细的进行免疫细胞的分型;单细胞转录组测序和单细胞表面蛋白测序的联合应用,可以更有效地识别致病机理。

1. 肝脏单细胞研究

研究团队结合单细胞CITE-seq等技术,绘制人类和小鼠肝脏单细胞空间蛋白质基因组图谱,分析脂质相关巨噬细胞群体;为了研究单细胞分辨率下的mRNA和蛋白质表达,对18个样品进行CITE-seq及数据分析,利用单细胞转录组数据和单细胞表面蛋白数据,有效确定了17种细胞类型,同时CITE-seq的抗体识别体系ADT可以有效捕获Kupffer细胞,并结合细胞群体分析,鉴定出VSIG4蛋白是CITE-seq数据中人类Kupffer细胞的最佳标记物。

2. 肺部癌症单细胞研究

该研究通过scRNA-seq和CITE-seq分析了目前最大的非小细胞肺癌(NSCLC)队列,展示了不同患者免疫反应的共性因素,确定了瘤突变负荷和TP53突变的独立免疫修饰效应,进而构建服务于免疫治疗反应的精细模型。通过scRNA-seq和CITE-seq分析了肿瘤微环境中转录状态的多样性。

通过对T细胞的CITE-seq数据研究发现,CD8+T细胞具有自然杀伤细胞(NK)的特征,区分出了正常组织和癌症组织的T细胞亚群,癌症组织的T细胞亚群种类

相关推荐: