转录是遗传信息从DNA到RNA传递的关键步骤,也是RNA生物合成的最主要形式。转录因子(transcription factor)是一类能与基因5’端特定序列专一性结合,使目的基因以特定的强度在特定的时间与空间表达的蛋白质分子,是参与转录调控的关键因素之一。
染色质免疫沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP)是一种分析 DNA 与蛋白质相互作用的研究方法。它的基本原理是活细胞或新鲜组织经过交联方式锁定核蛋白(转录因子、DNA损伤修复蛋白、组蛋白或DNA修饰酶、读取酶、去修饰酶等)与靶基因互作关系,再利用超声波物理法或生物酶法使染色质片段化,最后用核蛋白的特异性抗体,通过免疫结合的方式富集核蛋白所结合的 DNA 片段。核蛋白结合DNA片段分离纯化后,可以进行定量qPCR或高通量测序等分析。
ChIP技术原理图
应用范围
1. 验证已知蛋白-DNA相互作用;
2. 研究转录因子的靶向基因及结合位点;
3. 研究DNA/RNA聚合酶、转录复合物在基因组上的作用位点;
4. 研究组蛋白共价修饰与基因表达的关系。
产品优势
① 胞内反应:使用抗体免疫沉淀胞内蛋白-DNA复合物,真实反应细胞生理状态;
② 流程简便:操作简便;
③ 时间周期短:整个实验流程