碧云天的BeyoMag™磁珠法病毒RNA/DNA抽提试剂盒(BeyoMag™ Viral RNA/DNA Isolation Kit with Magnetic Beads),也称BeyoMag™磁珠法病毒核酸抽提试剂盒(BeyoMag™ Viral Nucleic Acid Isolation Kit with Magnetic Beads),是一种使用新型核酸纯化介质包被的磁珠,从含病毒的血浆、血清、体液、拭子及细胞及其培养上清、组织等样品中安全、快速、便捷、稳定、高效、高质量地抽提RNA/DNA的试剂盒。抽提获得的病毒RNA/DNA样品(可能同时含有样品中的其它RNA/DNA),后续可以用于病毒感染检测、病毒滴度检测各种常规用途。
本试剂盒抽提得到的病毒RNA/DNA可用于qRT-PCR、反转录、RT-PCR、PCR、qPCR、Northern、Southern、点杂交(Dot blot)、纯化mRNA、体外翻译、RNase protection assay、cDNA或DNA克隆等下游实验;也可用于基因表达芯片分析(Microarray)、高通量测序(High throughput sequencing)等对RNA/DNA质量要求较高的情况。
本试剂盒抽提病毒RNA/DNA的基本流程如图1所示。样品在裂解液中迅速裂解,释放出总RNA/DNA,然后让RNA/DNA特异性地结合到磁珠上,再通过3次洗涤充分去除非特异性结合的蛋白、盐等杂质,最后用洗脱液将高纯度的RNA/DNA洗脱下来。
图1. BeyoMag™磁珠法病毒RNA/DNA抽提试剂盒(R0083)抽提流程示意图。
本试剂盒使用安全。本试剂盒通过特殊的磁珠进行病毒RNA/DNA分离纯化,能有效避免传统的Trizol法抽提时使用的酚、氯仿等有毒有害有机试剂。
本试剂盒使用快速、便捷。本试剂盒采用磁珠纯化,无需繁琐的病毒RNA/DNA沉淀步骤,抽提操作过程仅15-20分钟。相比于传统的Trizol抽提法或DNA抽提方法,本试剂盒的操作流程显著简化,缩短了抽提时间, 降低了病毒RNA/DNA被降解的风险。和国外同类磁珠纯化产品相比,所需操作步骤和操作时间基本一致。
本试剂盒适用于含病毒的血浆、血清、体液、拭子及细胞及其培养上清、组织等样品中病毒RNA/DNA的抽提。对于样品中RNA/DNA含量较低的情况下,为提高病毒RNA/DNA的提取量,建议自备Carrier RNA。Carrier RNA一方面可以提高微量病毒RNA/DNA在纯化过程中与磁珠的结合效率和洗脱效率,另一方面可以降低被可能存在的痕量残留RNase降解的风险。Carrier RNA在病毒含量越低的情况下效果越为明显。Carrier RNA推荐选购碧云天的R0036 Carrier RNA (病毒RNA等抽提用)。
本试剂盒小包装R0083S可用于10个样品的RNA抽提,中包装R0083M可用于50个样品的RNA抽提,大包装R0083L可用于200个样品的RNA抽提。
包装清单: 产品编号 产品名称 包装 R0083S-1 BeyoMag™磁珠 0.2ml R0083S-2 裂解液 6ml R0083S-3 结合液(首次使用前加3.5ml无水乙醇) 2.5ml(+3.5ml) R0083S-4 洗涤液I 6.5ml R0083S-5 洗涤液II (首次使用前加-9ml无水乙醇) 3.6ml(+9ml) R0083S-6 洗脱液 1ml — 说明书 1份 产品编号 产品名称 包装 R0083M-1 BeyoMag™磁珠 1ml R0083M-2 裂解液 30ml R0083M-3 结合液(首次使用前加17.5ml无水乙醇) 12.5ml(+17.5ml) R0083M-4 洗涤液I 32ml R0083M-5 洗涤液II (首次使用前加45ml无水乙醇) 18ml(+45ml) R0083M-6 洗脱液 5ml — 说明书 1份 产品编号 产品名称 包装 R0083L-1 BeyoMag™磁珠 4ml R0083L-2 裂解液 120ml R0083L-3 结合液(首次使用前加70ml无水乙醇) 50ml(+70ml) R0083L-4 洗涤液I 125ml R0083L-5 洗涤液II (首次使用前加90ml无水乙醇) 36ml(+90ml),×2 R0083L-6 洗脱液 20ml — 说明书 1份 保存条件:室温保存,一年有效。其中BeyoMag™磁珠长期不使用时,可以4℃保存,4℃可以保存更长时间。
注意事项:首次使用前,结合液和洗涤液II按照说明书或瓶标上的指示加入相应量的无水乙醇,混匀,并在瓶上做好标记。
需自备磁分离装置,推荐使用碧云天的1.5/2ml磁分离架(FMS004/FMS008/FMS012/FMS016/FMS024)。
如果样品中含有细胞或组织,不影响病毒RNA/DNA的抽提,但须注意抽提获得的病毒RNA/DNA中包含细胞或组织的RNA/DNA。
为提高病毒RNA/DNA的提取量,推荐使用碧云天的Carrier RNA (病毒RNA等抽提用) (R0036)或自备Carrier RNA。
本试剂盒提供的所有试剂和耗材都是DNase/RNase-free,操作时应小心,避免被污染。所有自行准备的试剂和耗材也都应是DNase/RNase-free。如果可能有DNase/RNase污染,可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜,然后高温高压灭菌并烘干。操作时应避免对着样品或所使用的试剂盒耗材呼气或说话,以防RNase污染。建议戴一次性口罩操作。
对于操作环境中DNase/RNase的去除,推荐使用碧云天生产的RNase and DNase Away (R0123)以去除实验桌面上或其它接触面上的DNase/RNase。
使用冻存的样品抽提RNA的效果通常比新鲜的样品差一些。因为在样品冻融过程中一些RNase会被释放出来并消化样品中的RNA,建议尽量避免冻融。对于病毒样品,推荐使用碧云天生产的RNALater™病毒RNA稳定保存液(R0141)进行保存以保证样品RNA的完整性。
本试剂盒所有操作均在室温进行,操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
结合液、洗涤液中首次使用前添加无水乙醇后,须旋紧瓶盖以防挥发,并须按照易燃试剂的相关规范进行存放和使用。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。