硫酸铵分级沉淀蛋白质的原理和方法是什么啊？

原理就是溶液中的离子强度不同时，不同蛋白质的溶解度不同，步骤就是不断加硫酸铵…以血浆为例：加到盐浓度20~30%时纤维蛋白原沉淀，再加到浓度50%时球蛋白沉淀，饱和时清蛋白沉淀… 一，基本原理 硫酸铵沉淀法可用于从大量粗制剂中浓缩和部分纯化蛋白质。用此方法可以将主要的免疫球从样品中分离，是免疫球蛋白分离的常用方法。高浓度的盐离子在蛋白质溶液中可与蛋白质竞争水分子，从而破坏蛋白质表面的水化膜，降低其溶解度，使之从溶液中沉淀出来。各种蛋白质的溶解度不同，因而可利用不同浓度的盐溶液来沉淀不同的蛋白质。这种方法称之为盐析。盐浓度通常用饱和度来表示。硫酸铵因其溶解度大，温度系数小和不易使蛋白质变性而应用最广。 二，试剂及仪器 1.组织培养上清液、血清样品或腹水等 2.硫酸铵（NH4）SO4 3.饱和硫酸铵溶液（SAS） 4.蒸馏水 5.PBS(含0.2g/L叠氮钠) 6.透析袋 7.超速离心机 8.pH计 9.磁力搅拌器 三，操作步骤 以腹水或组织培养上清液为例来介绍抗体的硫酸铵沉淀。各种不同的免疫球蛋白盐析所需硫酸铵的饱和度也不完全相同。通常用来分离抗体的硫酸铵饱和度为33%—50%。 （一）配制饱和硫酸铵溶液（SAS） 1.将767g（NH4）2SO4边搅拌边慢慢加到1升蒸馏水中。用氨水或硫酸调到硫酸pH7.0。此即饱和度为100%的硫酸铵溶液（4.1mol/L,25°C）. 2.其它不同饱和度铵溶液的配制 （二）沉淀 1.样品（如腹水）20000′g离心30min，除去细胞碎片； 2.保留上清液并测量体积； 3.边搅拌边慢慢加入等体积的SAS到上清液中，终浓度为1：1（ 4.将溶液放在磁力搅拌器上搅拌6小时或搅拌过夜（4°C），使蛋白质充分沉淀。 （三）透析 1.蛋白质溶液10000′g离心30min（4°C）。弃上清保留沉淀； 2.将沉淀溶于少量（10-20ml）PBS-0.2g/L叠氮钠中。沉淀溶解后放入透析袋对 PBS-0.2g/L叠氮钠透析24-48小时（4°C），每隔3-6小时换透析缓冲液一次，以彻底除去硫酸氨； 3.透析液离心，测定上清液中蛋白质含量。 四，应用提示 （一）先用较低浓度的硫酸氨预沉淀，除去样品中的杂蛋白。 1.边搅拌边慢慢加SAS到样品溶液中，使浓度为0.5:1(v/v)； 2.将溶液放在磁力搅拌器上搅拌6小时或过夜（4°C）；3.3000′g离心30min（4°C），保留上清液；上清液再加SAS到0.5:1(v/v)，再次离心得到沉淀。将沉淀溶于PBS，同前透析，除去硫酸氨； 4.上清液再加SAS到0.5:1(v/v)，再次离心得到沉淀。将沉淀溶于PBS，同前透析，除去硫酸氨； 5.杂蛋白与欲纯化蛋白在硫酸氨溶液中溶解度差别很大时，用预沉淀除杂蛋白是非常有效 （二）为避免体积过大，可用固体硫酸氨进行盐析（硫酸氨用量参考表1）；硫酸氨沉淀法与层析技术结合使用，可得到更进一步纯化的抗体。

统计学：关于左侧检验，右侧检验，双侧检验 的疑问，实际中怎么判断是左侧检验，右侧检验，双侧检验？

在实际操作中，要根据研究的目的和假设来选择左侧检验、右侧检验还是双侧检验，如果假设中有一参数和另一参数方向性的比较，比如"大于"、"好于"、"差于"等，一般选择左侧检验或右侧检验。如果只是检验两参数之间是否有差异，就选择双侧检验。
 1、只强调差异，不强调方向性(比如大小、多少)的检验叫双侧检验，如检验样本和总体均值有无差异可采取双侧检验。
 2、强调某一方向的检验叫单侧检验，如要检验样本A均值是否显著大于样本B，可采取单侧检验。如果所要检验的是样本所取自的总体的参数值是否大于某个特定值时，则采用右侧检验；反之，若所要检验的是样本所取自的总体的参数值是否小于某个特定值时，则采用左侧检验。 
 

扩展资料：
 应从专业知识判断， 如果不清楚后测数据是否高于前测数据，研究目的是想判断前后测的均值是否不同，就需要用双侧检验。如果从专业知识判断， 如果后测数据不可能低于前测数据，研究目的是仅仅想知道后测数据是不是高于前测数据，则可以采用单侧检验。
 假设检验是一种解读数据的方式，有一个样本p，做出一个假设（零假设），做出假设的同时也就出现了假设的对立面，也就是备择假设。检验的过程就是求出在零假设为真的情况下，得到样本p的概率。
如果得到样本p的概率高，可以倾向于认为这个事件发生是合理的，选择相信这个假设。如果得到样本p的概率很低（一般不满足5%的显著性水平）， 认为这个事情不太可能发生，就拒绝相信这个假设，而选择相信它的对立面备择假设。
参考资料：
搜狗百科——假设检验
搜狗百科——双侧检验
搜狗百科——单侧检验